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①无菌材料获得。取高度10cm以上尚未贮水的吸芽，剥取方法和消毒方法同蜻蜓凤梨。剥除基部棕色硬质鞘叶后，切掉基部带黑色维管束的部分，并切到顶部的叶片，保留2～3cm的长度，直接在超净工作台上操作：用锋利的刀片逐层切掉剩余的叶片至叶片紧密包裹的部位，然后从基部切掉剩余叶片，用0.1%HgCl2水溶液振荡消毒15min（加2滴吐温），无菌水冲洗5～6次后，用无菌纸吸干水分，在超净台上吹干。
取消毒好的外植体，切去基部被HgCl2水溶液接触到的伤口部分，再逐层切去各层接触HgCl2水溶液的部分及顶部的叶片，保留1～2mm叶片或直接去掉顶部叶片和茎尖，将剩余的茎纵切4～8块，小切块基部向下竖直接种到培养基。
②不定芽诱导。不定芽诱导培养基：MS＋6-BA2.0～4.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋蔗糖30g/L＋卡拉胶5.8g/L，pH5.8～6.0。培养温度25～29℃，暗培养1周后，光照培养。光照时间10～12h/d，光照度20～30μmol/（m2穝）。
40d后，接种外植体叶腋处的侧芽开始膨大，后逐渐形成丛生芽。
③不定芽增殖。不定芽增殖培养基：MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋蔗糖30g/L＋卡拉胶5.8g/L，pH5.8～6.0。培养温度25～29℃，光照时间10～12h/d，光照度30～40μmol/（m2穝）。
不定芽增殖过程中也会产生瘤状的愈伤组织，继代后发育成不定芽。切除抽生过高的不定芽叶片，将丛生芽切分成小块，接种到继代培养基上，光照培养，每隔30～40d继代1次，增殖系数在5.0以上。
④壮苗培养。壮苗培养基：MS＋蔗糖30g/L＋卡拉胶5.8g/L，pH5.8～6.0。培养温度25～29℃，光照时间12～15h/d，光照度30～40μmol/（m2穝）。
把产生的丛生不定芽分成单株或切割成小块后接种于培养基中。每瓶接种10株或丛生芽4块。
⑤生根培养。生根培养基：MS＋NAA0.1mg/L＋蔗糖30g/L＋卡拉胶5.8g/L，pH5.8～6.0。培养温度25～29℃，光照时间15～20h/d，光照度40μmol/（m2穝）。
当继代增殖的丛生芽长高到3～4cm时，将丛生芽分成单株，接种到生根培养基上，每瓶10株。光照培养25d后，生根率达100%。生根苗叶片浓绿，植株粗壮。可置于荫棚（70%～80%遮阴度）内炼苗，5～7d后可进行移栽。
⑥移栽。移栽时，用清水将黏附在根上的培养基洗净，用0.2%～0.3%多菌灵水溶液浸泡10～15min，移栽到基质中，淋水定根。基质宜选疏松肥沃的表土并配以过筛的河沙及少量发酵过的椰糠为宜，并用土壤消毒剂消毒。移栽密度为每平方米100～120株。移栽后，遮阴保湿10～15d，然后逐渐去掉保湿遮阴物。
1. 选择外植体与接种 选择良好外植体是组织培养能否顺利成功的第一个关键。要选择生长健壮，无病虫侵害，发育良好的鳞茎，并用清水冲洗干净，表皮上的杂物可用中性肥皂搓洗。然后，用无菌水冲洗数次，放入70%酒精中消毒 30分钟，再经0.1%升汞浴液消毒 5～3 0分钟（时间因品种而异）。取出后，用无菌水冲洗，再经过切块，然后接种到培养基上，放入培养间。培养基以MS培养基为基础。接种需要无菌环境，并要迅速、准确。
2. 接种后管理 接种后培养间温度应保持在15～20℃之间，光照强度在自然散射光线的情况下增加1000勒克斯的日光灯照。大约 10～15天后，外植体开始膨大，25～30天形成愈伤组织，80～90天幼芽开始分化，150～180天形成独立小苗，240天可形成有空心茎的小苗。在这个管理过程中，每30天左右要转移一次，以免老化。根据试验结果说明，如果在培养基中加入活性炭，并在黑暗条件下培养，效果更加明显，它在3个月后可直接形成子鳞茎，可缩短成花的时间，但繁殖系数要较正常的低。
3. 小苗的移植培养 小苗有了空心茎后，就需要及时移栽到苗床上。苗床的栽植土要求疏松透气，并有一定的保水、保肥能力，必须经过消毒。苗床外的温室环境必须有一定的遮阳设备，冬天需要加温设备，夏天需要降水系统。苗刚移植前需要2～3天锻炼，打开培养瓶盖，让其逐步的与外界环境适应。锻炼后，取出小苗，洗去培养基，移栽入苗床，细雾浇水，注意茎部不沾土壤，免受感染。前期要注意遮阳，并控制浇水量，随着小苗长大，减少遮阳时间，适当加大浇水量，并开始施加稀薄液肥。当小苗根子较茁壮时，已具有较强的抗逆能力，可以考虑移植了。
这里需要强调的是，温度对郁金香的组织培养有着决定性的影响。不同的品种，适宜的培养温度是不同的。适宜A品种的温度，放在B品种上，可能会形不成不定芽。据试验表明，温度的变化，引起培养基内生长素和激动素的浓度差异，从而影响愈伤组织不定芽的形成。因此，对郁金香进行组织培养时，要根据品种来确定最合适的培养温度，能够事半功倍，提高培养的成功率。
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